一、酶標(biāo)記

二、熒光染料標(biāo)記

熒光標(biāo)記技術(shù)是指將能發(fā)射熒光的標(biāo)記物通過共價(jià)結(jié)合或物理吸附等方式標(biāo)記于目標(biāo)分子的某個(gè)基團(tuán)上，從而利用標(biāo)記物的熒光特性來反映研究對(duì)象的信息。常見的熒光染料包含小分子熒光染料、時(shí)間分辨熒光材料、上轉(zhuǎn)化發(fā)光材料、量子點(diǎn)熒光材料等。

部分常見熒光標(biāo)記物的激發(fā)和發(fā)射波長

三、生物素標(biāo)記

生物素標(biāo)記反應(yīng)常用生物素琥珀酰亞胺酯進(jìn)行。生物素是與抗體分子的游離賴氨酸等發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)而完成標(biāo)記。一般一個(gè)抗體可以標(biāo)記3-5個(gè)生物素，標(biāo)記時(shí)，生物素與抗體的比率受抗體濃度影響，對(duì)于10 mg/ml 的抗體溶液來說，生物素應(yīng)超過蛋白12倍（摩爾數(shù)），對(duì)于2 mg/ml 的抗體溶液應(yīng)超過20倍，生物素也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中。

四、膠體金標(biāo)記

膠體金標(biāo)記是利用氯金酸在還原劑作用下聚合成直徑 1~150nm的金顆粒, 形成帶負(fù)電的疏水膠溶液。由于靜電作用成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài), 稱膠體金。

膠體金標(biāo)記就是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機(jī)理是膠體金顆粒具有高電子高密度的特性, 其表面的負(fù)電荷能與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)靜電吸附而牢固結(jié)合。

不同免疫檢測實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用到的標(biāo)記物類型匯總